Kurzbeschreibung
Das OMNISEC GPC/SEC-Multidetektorsystem ist ein Gelpermeationschromatographie (GPC)/Größenausschluss-Chromatographie (SEC)-System und kombiniert analytische SEC mit einem integrierten Multidetektormodul (Brechungsindex, Lichtstreuung und UV/VIS-PDA) zur genauen Bestimmung der Molekulargewichte und Konzentrationen von Proteinen. Darüber hinaus kann es verwendet werden, um die Reinheit einer Probe sowie den oligomeren Zustand von Proteinen und Proteinkomplexen zu bestimmen. Die OMNISEC ist ein effektives Werkzeug, um die Qualität von Proteinen und anderen Biomolekülen zu überprüfen und somit den Wert einer Probe zu bestimmen.
Ansprechperson
Georg Mlynek PhD, Elisabeth Laurent PhD
Research Services
Bitte um Kontaktaufnahme per email unter bmca@boku.ac.at
Methoden & Expertise zur Forschungsinfrastruktur
Bei der Größenausschluss-Chromatographie werden Moleküle gemäß ihrem hydrodynamischen Radius getrennt, wenn sie in die Poren einer porösen Gelpackungsmatrix in einer Säule eindringen und diese wieder verlassen. Das OMNISEC GPC/SEC-Multidetektorsystem besteht aus einer Pumpe, einem temperaturgesteuerten Autosampler und Säulenofen. Während die Probe eluiert, wird sie von drei in Serie geschalteten Detektoren analysiert. Der Brechungsindex (RI)-Detektor bestimmt die Konzentration der Probe durch Messung der RI-Differenz zwischen einer Referenzflüssigkeit und der Probenflüssigkeit. Das Diodenarray UV/Vis-Spektrometer misst die Extinktion einer Probe in einem Wellenlängenbereich von 190-900 nm. Der Lichtstreudetektor besteht aus einer 90° Rechtwinkellichtstreuung (RALS - Right-Angle Light Scattering) und einer 7° Kleinwinkellichtstreuung (LALS - Low-Angle Light Scattering). Während der RALS-Detektor eine hohe Empfindlichkeit für kleinere Moleküle bietet, ist der LALS-Detektor genauer für größere Moleküle. Durch die Kombination beider Detektoren in einem Hybridsystem kann das Signal-Rausch-Verhältnis für eine genaue Bestimmung des Molekulargewichts der Moleküle in einer Probe maximiert werden.